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ELISA實驗加樣防錯小竅門

  • 發(fā)布日期:2019-04-02      瀏覽次數(shù):2153
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          ELISA加樣時的防錯小竅門

          (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。

          (2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。

          (3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分。

          實驗常見問題解析

          問:做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶。可是結(jié)果除了空白對照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?

          答:可能原因如下: 
          (1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
          (2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔,充分洗滌。
          (3) 移液頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
          (4) 酶標(biāo)板靈敏度過高。
          (5) 一抗顯色時間的控制等等,關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

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